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什么是HEK293 細胞,293細胞的應(yīng)用有哪些方面?

 更新時間:2022-08-18 點擊量:3463

如果您*熟悉細胞培養(yǎng),您可能聽說過 HEK293 細胞。HEK293 細胞新藥實驗室 較為常用的細胞系之一。但它們是什么?為什么要使用它們?“293" 是什么意思?與HEK293T 細胞相同嗎?請繼續(xù)閱讀這些問題的答案以及更多內(nèi)容。
一、什么是 HEK293 細胞?
HEK293 細胞是人類胚胎腎細胞,起初由荷蘭生物學家 Alex Van der Eb 在 1970 年代初期分離和培養(yǎng)。Van der Eb 實驗室的博士后 Frank Graham 用剪切的腺病毒 5 (Ad5) DNA 進行轉(zhuǎn)染 。這是他們的第 293 次實驗,所以就命名該細胞系為 HEK293 ,蓋細胞系的主要作用是通過細胞的基因改造實現(xiàn)重組蛋白合成。那么,HEK293T 細胞與HEK293是同一種細胞嗎?
其實,并不*是,因為系HEK293T細胞的來源是將 SV40 大 T 抗原整合到 HEK293 基因組中——這意味著它們能夠從攜帶 SV40 復制起點的質(zhì)粒載體中產(chǎn)生大量蛋白質(zhì)。 
HEK293t
二、HEK 細胞有何優(yōu)點?
使用 HEK293 細胞有很多優(yōu)點。它們是一種耐寒、半貼壁、低維護的細胞系,分裂迅速,大約每 36 小時可以增長 1倍。培養(yǎng)的細胞既能用于瞬時和穩(wěn)定表達,也可懸浮培養(yǎng)或作為單層培養(yǎng),比較容易轉(zhuǎn)染,并且能夠產(chǎn)生大量的 重組蛋白。
目前,HEK293 細胞主要用于癌癥研究、新藥開發(fā)、抗體蛋白生產(chǎn)、信號轉(zhuǎn)導和蛋白質(zhì)相互作用研究等領(lǐng)域。
三、 HEK293 細胞的分類
HEK293 細胞已被用于創(chuàng)建具有特定用途的各種衍生細胞系。
表 1:HEK293 細胞的一些常用衍生物。

衍生物

特征

293-F

快速成長;懸浮生長;在無血清培養(yǎng)基中生長

293-H

快速成長;懸浮生長;在無血清培養(yǎng)基中生長;在斑塊檢測中具有良好的依從性

293T

高轉(zhuǎn)染性;包含 SV40 T 抗原

293

293-F 細胞系的衍生物;快速增長;包含 SV40 T 抗原

293E或239-EBNA1

表達 EBNA-1 蛋白

四、HEK293的生長條件
HEK293 細胞生長對培養(yǎng)環(huán)境要求不高。一般情況下維持 37°C 和 5% CO 2的加濕培養(yǎng)箱及充足的培養(yǎng)基供應(yīng)即可滿足 ,為防止細菌感染,必要時可添加少許抗生素,比如:青霉素-鏈霉素-谷氨酰胺等。細胞轉(zhuǎn)染方式可以建議使用HEK293 轉(zhuǎn)染試劑盒,操作方便、簡單。
HEK293細胞轉(zhuǎn)染試劑盒
五、HEK293 細胞培養(yǎng)注意事項
1.HEK293在進行傳代培養(yǎng)時,長期培養(yǎng)會導致細胞活力下降,所以培養(yǎng)代數(shù)不宜過多,通常培養(yǎng)的代數(shù)維持在13代以下,如果選擇的細胞系超過20代,需要需要解凍新的細胞重新開始。
2.實驗操作過程中需要注意無菌操作,避免支原體感染,同時做好定時檢測。
3.由于HEK293 細胞系的衍生物較多,所以培養(yǎng)時需要根據(jù)實驗選擇合適的細胞系進行培養(yǎng)。


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