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人骨髓間充質(zhì)干細胞用什么培養(yǎng)基培養(yǎng)?

 更新時間:2024-07-09 點擊量:526

 人骨髓間充質(zhì)干細胞Human Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,簡稱 HBMSCs)是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細胞,可以分化成多種類型的細胞,如骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞等。在組織工程、再生醫(yī)學以及Cell Therapy等領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。為了獲得高質(zhì)量的人骨髓間充質(zhì)干細胞,選擇合適的培養(yǎng)基至關(guān)重要。人骨髓間充質(zhì)干細胞用什么培養(yǎng)基培養(yǎng)?

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一、人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基的選擇

1. 無血清培養(yǎng)基

無血清培養(yǎng)基是指不含有血清的培養(yǎng)基,通過添加適量的生長因子、激素和營養(yǎng)物質(zhì)等,模擬生物體內(nèi)的生長環(huán)境,從而實現(xiàn)細胞的生長和繁殖。無血清培養(yǎng)基具有以下優(yōu)點:

1)避免血清中病原微生物的傳播,降低細胞培養(yǎng)過程中的污染風險。

2)避免血清中不同批次間的差異,提高實驗的可重復性。

3)有利于細胞產(chǎn)品的臨床應(yīng)用,減少血清中潛在過敏原的攝入。

2. 含血清培養(yǎng)基

含血清培養(yǎng)基是指含有血清的培養(yǎng)基,血清中含有豐富的生長因子、激素和營養(yǎng)物質(zhì),可以滿足細胞生長的需求。含血清培養(yǎng)基具有以下優(yōu)點:

1)細胞生長速度快,易于獲得大量細胞。

2)細胞生長狀態(tài)穩(wěn)定,易于培養(yǎng)。

但含血清培養(yǎng)基也存在一定的缺點,如血清來源不穩(wěn)定、病原微生物污染風險、不同批次間差異較大等。因此,在選擇培養(yǎng)基時,可根據(jù)實驗需求和細胞特性進行綜合考慮。

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二、充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基的培養(yǎng)方法

1. 細胞接種

將凍存的HBMSCs從液氮中取出,迅速放入37℃水浴中解凍。解凍后,將細胞懸液離心,去除凍存液,用預(yù)熱的培養(yǎng)基洗滌細胞兩次。最后,用適量的培養(yǎng)基重懸細胞,調(diào)整細胞密度,接種到培養(yǎng)瓶中。

2. 培養(yǎng)條件

將接種好的細胞放入37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中,靜置培養(yǎng)。根據(jù)細胞生長情況,每隔2-3天更換一次培養(yǎng)基。

3. 細胞傳代

當細胞生長至80%-90%匯合時,進行細胞傳代。首先,用PBS洗滌細胞兩次,去除殘留的培養(yǎng)基。然后,用胰酶消化細胞,待細胞間隙增大、細胞變圓時,加入含血清的培養(yǎng)基終止消化。最后,將細胞懸液離心,去除胰酶,用適量的培養(yǎng)基重懸細胞,進行傳代培養(yǎng)。

4. 細胞凍存

將生長狀態(tài)良好的細胞用胰酶消化,離心后去除胰酶,用凍存液重懸細胞。將細胞懸液分裝到凍存管中,放入-80℃冰箱過夜,次日轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存。

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三、人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基的應(yīng)用

1. 組織工程

HBMSCs具有多向分化潛能,可以分化為骨細胞、軟骨細胞、脂肪細胞等。在組織工程中,將HBMSCs與生物材料結(jié)合,可以構(gòu)建具有生物活性的組織,如骨組織、軟骨組織等。

2. 再生醫(yī)學

HBMSCs可以參與組織的損傷修復,通過細胞移植或局部注射等方法,將HBMSCs應(yīng)用于臨床治療,如骨損傷、軟骨損傷、心肌梗死等疾病。

3. Cell Therapy

4. HBMSCs具有免疫調(diào)節(jié)作用,可以用于Cell Therapy,如移植物抗宿主?。?/span>GVHD)、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)等。此外,HBMSCs還可以用于治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病、肝臟疾病等。

人間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)基的選擇和培養(yǎng)方法對HBMSCs的研究和應(yīng)用具有重要意義。合適的培養(yǎng)基可以保證細胞的高質(zhì)量生長,為后續(xù)實驗和應(yīng)用提供可靠的基礎(chǔ)。

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