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病毒實(shí)驗(yàn)原理和慢病毒包裝系統(tǒng)介紹

 更新時(shí)間:2023-04-13 點(diǎn)擊量:1307

  慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu)、球形。病毒顆粒最外層是包膜(包膜蛋白決定了感染細(xì)胞的類(lèi)型),再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼,最里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶)。
 
慢病毒實(shí)驗(yàn)原理
慢病毒(Lentivirus)是逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種,基因組為雙鏈RNA。但區(qū)別于一般的逆轉(zhuǎn)錄病毒,慢病毒具有更廣的宿主范圍,對(duì)分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力。
重組慢病毒載體是以HIV-1(人類(lèi)免疫缺陷I 型病毒)為基礎(chǔ)發(fā)展起來(lái)的工具載體,其毒性基因已經(jīng)被剔除并被外源目的基因所取代,屬于假型病毒。(一次性感染能力而無(wú)復(fù)制產(chǎn)生新病毒能力)
 
將靶基因隨機(jī)整合到宿主的基因組中,并且能夠在細(xì)胞系中穩(wěn)定表達(dá)若干代,可以進(jìn)行穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的篩選。被廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞系基因敲除、基因過(guò)表達(dá)、RNA干擾。
 
 
包裝系統(tǒng)
慢病毒載體包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息。
慢病毒包裝質(zhì)??商峁┺D(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的輔助蛋白。
1. 外殼糖蛋白 識(shí)別并感染宿主細(xì)胞
2. 結(jié)構(gòu)蛋白 病毒復(fù)制所需要的酶
慢病毒特點(diǎn)
1. 慢病毒有廣泛的宿主范圍,能夠有效地感染分裂細(xì)胞、非分裂細(xì)胞,特別適合于一些難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞(如原代細(xì)胞、干細(xì)胞、不分化的細(xì)胞)和對(duì)腺病毒感染具有較強(qiáng)免疫反應(yīng)的細(xì)胞(如樹(shù)突狀細(xì)胞、單核細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞)等,能大大提高目的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,而且目的基因整合到宿主細(xì)胞基因組的幾率大大增加。
 
2. 慢病毒能將外源基因有效地整合入宿主染色體上,介導(dǎo)目的基因穩(wěn)定、長(zhǎng)期的表達(dá)。因此,可以利用慢病毒建立穩(wěn)定細(xì)胞株。
 
3. 適用范圍更廣,不僅能用于體外實(shí)驗(yàn),還能用于活體動(dòng)物模型,尤其是動(dòng)物成瘤實(shí)驗(yàn)。


 
慢病毒包裝系統(tǒng)采用的包裝系統(tǒng)是2代包裝系統(tǒng),即三質(zhì)粒系統(tǒng),該系統(tǒng)包括1個(gè)包裝質(zhì)粒(psPAX2)、1 個(gè)包膜質(zhì)粒(pMD2G)、1個(gè)目的基因質(zhì)粒和1株包裝細(xì)胞(293T cell)。
 
蘇州阿爾法生物提供細(xì)胞培養(yǎng)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備、細(xì)胞培養(yǎng)耗材、細(xì)胞株、基因編輯細(xì)胞株、所提供的CRISPR-Cas9表達(dá)病毒具有以下特點(diǎn):
1、病毒產(chǎn)品現(xiàn)貨提供;
2、可以滿足不同細(xì)胞的穩(wěn)轉(zhuǎn)的需求;
3、攜帶抗性用于穩(wěn)轉(zhuǎn)構(gòu)建;
4、表達(dá)穩(wěn)定適合用于基因敲除;
了解更多內(nèi)容請(qǐng)進(jìn)入蘇州阿爾法生物實(shí)驗(yàn)器材有限公司咨詢。
慢病毒實(shí)驗(yàn)原理和慢病毒包裝系統(tǒng)介紹
 
慢病毒是一種有包膜的RNA病毒,直徑為80-120nm,呈二十面體對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu)、球形。病毒顆粒最外層是包膜(包膜蛋白決定了感染細(xì)胞的類(lèi)型),再往里依次為基質(zhì)蛋白和衣殼,最里面是兩條相同的正股RNA鏈和酶(逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶)。
 
 
慢病毒實(shí)驗(yàn)原理
慢病毒(Lentivirus)是逆轉(zhuǎn)錄病毒的一種,基因組為雙鏈RNA。但區(qū)別于一般的逆轉(zhuǎn)錄病毒,慢病毒具有更廣的宿主范圍,對(duì)分裂細(xì)胞和非分裂細(xì)胞均具有感染能力。
重組慢病毒載體是以HIV-1(人類(lèi)免疫缺陷I 型病毒)為基礎(chǔ)發(fā)展起來(lái)的工具載體,其毒性基因已經(jīng)被剔除并被外源目的基因所取代,屬于假型病毒。(一次性感染能力而無(wú)復(fù)制產(chǎn)生新病毒能力)
 
將靶基因隨機(jī)整合到宿主的基因組中,并且能夠在細(xì)胞系中穩(wěn)定表達(dá)若干代,可以進(jìn)行穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株的篩選。被廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞系基因敲除、基因過(guò)表達(dá)、RNA干擾。
 
 
包裝系統(tǒng)
慢病毒載體包含了包裝、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定整合所需要的遺傳信息。
慢病毒包裝質(zhì)粒可提供轉(zhuǎn)錄并包裝RNA到重組的假病毒載體所需要的輔助蛋白。
1. 外殼糖蛋白 識(shí)別并感染宿主細(xì)胞
2. 結(jié)構(gòu)蛋白 病毒復(fù)制所需要的酶
慢病毒特點(diǎn)
1. 慢病毒有廣泛的宿主范圍,能夠有效地感染分裂細(xì)胞、非分裂細(xì)胞,特別適合于一些難轉(zhuǎn)染的細(xì)胞(如原代細(xì)胞、干細(xì)胞、不分化的細(xì)胞)和對(duì)腺病毒感染具有較強(qiáng)免疫反應(yīng)的細(xì)胞(如樹(shù)突狀細(xì)胞、單核細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞)等,能大大提高目的基因轉(zhuǎn)導(dǎo)效率,而且目的基因整合到宿主細(xì)胞基因組的幾率大大增加。
 
2. 慢病毒能將外源基因有效地整合入宿主染色體上,介導(dǎo)目的基因穩(wěn)定、長(zhǎng)期的表達(dá)。因此,可以利用慢病毒建立穩(wěn)定細(xì)胞株。
 
3. 適用范圍更廣,不僅能用于體外實(shí)驗(yàn),還能用于活體動(dòng)物模型,尤其是動(dòng)物成瘤實(shí)驗(yàn)。


 
慢病毒包裝系統(tǒng)采用的包裝系統(tǒng)是2代包裝系統(tǒng),即三質(zhì)粒系統(tǒng),該系統(tǒng)包括1個(gè)包裝質(zhì)粒(psPAX2)、1 個(gè)包膜質(zhì)粒(pMD2G)、1個(gè)目的基因質(zhì)粒和1株包裝細(xì)胞(293T cell)。
 
  蘇州阿爾法生物提供細(xì)胞培養(yǎng)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備、細(xì)胞培養(yǎng)耗材、細(xì)胞株、基因編輯細(xì)胞株、所提供的CRISPR-Cas9表達(dá)病毒具有以下特點(diǎn):
1、病毒產(chǎn)品現(xiàn)貨提供;
2、可以滿足不同細(xì)胞的穩(wěn)轉(zhuǎn)的需求;
3、攜帶抗性用于穩(wěn)轉(zhuǎn)構(gòu)建;

4、表達(dá)穩(wěn)定適合用于基因敲除;

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